Octet 分子相互作用技術(shù)平臺(tái)
ForteBio公司的Octet分子 相互作用技術(shù)平臺(tái)包括儀器、生物傳感器和相應(yīng)試劑盒,是一種免標(biāo)記的,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的先進(jìn)技術(shù),主要用于生物分子間相互作用動(dòng)力學(xué)參數(shù)以及蛋白濃度的測(cè)定。該平臺(tái)通過(guò)浸試即讀的監(jiān)測(cè)方式(Dip and ReadTM)來(lái)提高了檢測(cè)通量,簡(jiǎn)單易學(xué)并有利于優(yōu)化操作流程,使得用戶能在數(shù)分鐘內(nèi)就可以獲得大量的可靠數(shù)據(jù)。在很多的應(yīng)用領(lǐng)域中,這種技術(shù)平臺(tái)可以作為ELISA,HPLC以及SPR技術(shù)分析方法的有效替代手段。
Octet系統(tǒng)的蛋白濃度定量和生物分子間相互作用動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定(Ka,Kd和KD),可以為早期研發(fā)過(guò)程提供重要的信息;同時(shí),它的高通量?jī)?yōu)點(diǎn)可以大大節(jié)省研發(fā)的時(shí)間。它不僅可以運(yùn)用于早期的研發(fā)和篩選以及晚期的臨床試驗(yàn),還可以用于生產(chǎn)監(jiān)控和質(zhì)量監(jiān)控。正是因?yàn)镺ctet平臺(tái)不需要微流體控制系統(tǒng),所以可以適用于粗樣品檢測(cè);它的高通量特性使得其適用于抗體和化合物庫(kù)的篩選。
BLI非標(biāo)記檢測(cè)能跟蹤檢測(cè)溶液中分子與生物傳感器之間的結(jié)合,解離整個(gè)過(guò)程的變化。同一平臺(tái),多種應(yīng)用:
二、Octet 分子相互作用技術(shù)平臺(tái)--抗體和其他蛋白的定量
Octet平臺(tái)可以對(duì)抗體和其他蛋白進(jìn)行快速濃度測(cè)定,這使得該平臺(tái)可以用于表達(dá)庫(kù)的篩選、上游與下游的生產(chǎn)過(guò)程控制盒生物學(xué)治療中生物標(biāo)記物的濃度定量測(cè)定。
· 測(cè)定結(jié)果與HPLC有很好的可比性,精密度優(yōu)于ELISA。
· 15分鐘左右可以測(cè)定96個(gè)樣品的濃度
· 直接測(cè)定的形式,不需要標(biāo)記和其他試劑
· 不需要繁瑣的純化工程,可以直接測(cè)定諸如培養(yǎng)上清等粗樣品
· 可以提供定制服務(wù),根據(jù)用戶需要制作特殊的生物傳感器
三、Octet 分子相互作用技術(shù)平臺(tái)--更快更準(zhǔn)的ELSA測(cè)定
與ELISA相比,Octet平臺(tái)自動(dòng)化程度高,測(cè)定的速度快,而且可以獲得更豐富更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù),可以運(yùn)用于藥代動(dòng)力學(xué)和生物學(xué)治療中生物標(biāo)記物的測(cè)定。
· 高靈敏度的2步法和3步法測(cè)定
· 測(cè)定條件可以在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)進(jìn)行優(yōu)化
· 測(cè)試可以在3小時(shí)內(nèi)結(jié)束,不要進(jìn)行過(guò)夜包被
· 全自動(dòng)系統(tǒng),不需要洗滌步驟,節(jié)省了時(shí)間并減少了人為誤差
· 實(shí)時(shí)的相互作用數(shù)據(jù)比ELISA所用的終點(diǎn)判定法可以提供諸如解離常數(shù)等更多的信息。
· 可以檢測(cè)到ELISA檢測(cè)不到的更弱的結(jié)合
四、Octet 分子相互作用技術(shù)平臺(tái)--功能篩選及定性分析
Octet系統(tǒng)提供了存在于粗樣品中的單抗和抗原間的快速的檢測(cè)方法。這樣可以為抗體藥物的篩選、過(guò)程優(yōu)化以及疫苗的研發(fā)中盡早提供重要的信息,幫戰(zhàn)客戶盡早作出判斷。
· Ka,Kd和KD 等動(dòng)力學(xué)參數(shù)的研究
· 親和力參數(shù)的測(cè)試范圍從mM到pM級(jí)別
· 科技檢測(cè)血清或者細(xì)胞裂解上清等樣品
· 抗原表位鑒定和配對(duì)抗體篩選-在6個(gè)小時(shí)內(nèi)可以做34×34個(gè)反應(yīng)
· 可以同時(shí)測(cè)定8個(gè)(96孔板)或者16個(gè)樣品(96孔板或384孔板)
· 可以測(cè)定膜蛋白和病毒顆粒的動(dòng)力學(xué)參數(shù)
五、Octet 分子相互作用技術(shù)平臺(tái)--小分子化合物和分子片段篩選
Octet系統(tǒng)可以快速的檢測(cè)小分子化合物,實(shí)現(xiàn)從化學(xué)靶物到先導(dǎo)化合物(hit to lead)的檢測(cè)
· 非標(biāo)記檢測(cè)大于150Da化合物
· 提供高質(zhì)量的動(dòng)力學(xué)參數(shù),包括Ka,Kd以及穩(wěn)態(tài)KD
· 快速化合物庫(kù)篩選——8個(gè)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)1000個(gè)化合物
· 不需要進(jìn)行容積校正——Octet系統(tǒng)可以耐受高濃度的DMSO
· 多功能的軟件使得數(shù)據(jù)分析更簡(jiǎn)單,高通量的流程更簡(jiǎn)潔
Octet 分子相互作用技術(shù)平臺(tái)--技術(shù)優(yōu)勢(shì)
良好的性能——非??煽康兀哔|(zhì)量的數(shù)據(jù)
· 免標(biāo)記,實(shí)時(shí)監(jiān)控
· 具備HPLC的準(zhǔn)確性
· 比ELISA更好的精密度
· 與SPR和ITC方法的檢測(cè)的結(jié)果一致
· 可以檢測(cè)粗樣品,比如高粘度的液體,低溶解度的分析物
簡(jiǎn)單——容易學(xué)習(xí)和操作
· 2小時(shí)內(nèi)就可以掌握
· 全自動(dòng)的操作平臺(tái)
· 無(wú)需微流控系統(tǒng),不需要專(zhuān)業(yè)的維護(hù)和操作人員
· 眾多不同種類(lèi)的生物傳感器可以滿足不同的需要
· 直觀的操作和分析軟件
快速——更快地知道結(jié)果,高通量
· 對(duì)96個(gè)樣品進(jìn)行濃度檢測(cè)只要15分鐘
· 篩選1000種化合物在6個(gè)小時(shí)內(nèi)完成
· 多步法ELISA檢測(cè)在3個(gè)小時(shí)內(nèi)完成
· 96孔和384孔的加樣形式
· 可以與自動(dòng)化工作站兼容
效率——高效的操作流程,便宜的成本
· 在數(shù)小時(shí)內(nèi)建立檢測(cè)方法
· 粗樣品不需要純化,可以直接檢測(cè)
· 寬泛的檢測(cè)范圍,樣品可以不用稀釋?zhuān)黾訙?zhǔn)確性
· 生物傳感器可以多次再生
· 非破壞性樣品檢測(cè),樣品可以回收利用
· 樣品耗用量極低
BLI基本原理
Octet系統(tǒng)所運(yùn)用的生物膜干涉技術(shù),是一種免標(biāo)記技術(shù),實(shí)時(shí)提供高通量的生物分子相互作用信息。該儀器發(fā)射白光到傳感器表面并收集反射光,不同頻率的反射光譜受到生物傳感器的光膜層厚度的影響,一些頻率的反射光形成了相長(zhǎng)干涉(藍(lán)色),而另一些受到了相消干涉(紅色)。這些干涉被光譜儀所檢測(cè)到,并形成一幅干涉光譜,并以干涉光譜的相位位移強(qiáng)度(nm)顯示。因此,結(jié)合到傳感器表面的分子一旦有數(shù)量上的增減,光譜儀變會(huì)實(shí)時(shí)地檢測(cè)到干涉 光譜的位移,而這種位移直接反應(yīng)出傳感器表面生物膜的厚度。
生物膜干涉技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)
· 可以獲取生物分子相互作用的高質(zhì)量的數(shù)據(jù)
· 直接作用的檢測(cè)方式,可免去標(biāo)記和信號(hào)放大步驟
· 實(shí)時(shí)監(jiān)控可以對(duì)相互作用進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分析
· 良好的反應(yīng)特異性,即使在粗樣品中
· 適用于非常廣泛的不同物質(zhì)分子
短短數(shù)年,全球已有超過(guò)300家用戶選擇Fortebio Octet平臺(tái),并發(fā)表了超過(guò)100篇的文獻(xiàn)。在中國(guó),國(guó)家抗體中心、中科院、華東理工大學(xué)、藥明康德、諾華等不同領(lǐng)域的用戶,正在使用這項(xiàng)創(chuàng)新的技術(shù)。